단백질의 정량
Ⅰ. 실험 목적
단백질 정량의 원리를 이해하고, 우유 속 단백질을 정량해본다.
Ⅱ. 서론
1) 단백질 정량
단백질 정량이란 sample 내에 포함된 단백질의 양, 또는 농도를 구하는 과정으로써, 대부분의 생명과학실험의 기본이 되는 과정이라고 할 수 있다. 단백질의 농도를 정량하는 방법에는 UV법, lowry법, BCA법, Bradford법 등이 있다. 각각의 단백질 종류에 의한 감도의 차이, 방해물질의 종류와 허용농도 및 반응액의 pH 등에 차이가 있으므로 측정할 대상에 따라 적당한 방법을 선택하여야 한다.
2) 단백질 정량방법
(1) UV법
단백질에 있는 티로신, 페닐알라닌 및 트립토판 잔기들은 약 280㎚의 자외선을 흡수하는데 많은 단백질에서 이 아미노산을 합친 수준은 거의 일정하므로 단백질의 농도는 280㎚에서의 흡광도와 비례하게 된다. 단백질의 흡광도는 주로 방향족 화합물 잔류물에 기인하는 점에 주목해야한다. 흡광계수(: 빛이 시료 1cm를 통과할 때의 흡광도)는 단백질시료에 따라 다르므로 원하는 단백질의 흡광 계수값을 알면 시료의 농도측정이 가능하게 된다.
-장점: 빠르고, 다른 시약이 필요 없으며, 단백질 시료를 회수하여 그대로 쓸 수 있다.
-단점: 자연계에는 280㎚에서 높은 흡광도를 지니는 화합물들이 많이 있고, 핵산과 섞여있는 경우 260㎚에서의 흡광도를 측정해 보정해야 한다는 번거로움도 있다.
(2) 뷰렛(Biuret)법
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2013.05.01
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