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실험 제목 : 현미경 사용법 및 단순 염색(simplestain)과 그람 염색(gramstain)
그람 염색을 통해 그람 양성균과 음성균을 구분하고, 염색의 원리와 방법을 습득할 수 있다.
사진 1.그람 양성균과 그람 음성균 비교
a.그람 염색의 원리
보라색의 염기성 색소인 crystalviolet으로 염색(1분간) 하면 그 람 양성균과 그람 음성균 모두 보라색으로 염색된다.
사진 2.그람 염색
그람 염색
그람 염색의 한계
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Ⅰ. 기본정보
Ⅱ. 서론 (Introduction)
1. 현미경 (Microscope)
1-1) 현미경의 구조
1-2) 현미경 관찰
2. 그람양성균과 그람음성균의 차이
2-1) 그람 양성균 (Gram-positive)
2-2) 그람 음성균 (Gram-negative)
3. 염색
3-1) 단순염색 (simple stain)
3-2) 그람염색 (gram stain)
Ⅲ. 실험재료 및 방법 (Materials & Methods)
1. 실험재료(Materials)
2. 실험 방법 (Methods)
2-1) 현미경 관찰
2-2) 단순염색
2-3) 그람염색
Ⅳ. 실험결과 및 결론 (Data and Results)
Ⅴ. 고찰 (Discssion)
Ⅵ. 참고 문헌 (Reforence) |
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현재 다양한 형태의 현미경 이 사용되고 있는데 광학적 원리에 따르면 광학현미경(LightMicros cope), 암시야현미경(Darkfieldmicros cope), 위상차현미경(Phas econtrastm cros cope)과 형광현미경(Flu ores cencemicros cope)의 4 종류로 구분이 된다.
현미경 대안렌즈 겸통에는 2개의 렌즈가 들어있다.
경통의 최하단에 있는 대물렌즈 교환기(revolver)에 결합되어 있는 렌즈로서, 물페를 1차적으로 확대시킨다.
재물대 밑에 붙어 있으며 광원으로부터 나온 빛을 모으고 광도를 조절하는 역할을 한다.
i.초점 조절나사(focus ingknobs)
대물렌즈와 시료 간의 거리를 조절하는 나사
조동조절나사 : 저배율로 관찰할 때에 초점을 찾기 위하여 사용
미동조절나사 : 정확한 초점을 찾을 때 사용
a.대표적인 그람 음성균
대장균(Escherichiacoli), 콜레라균(Vibrioc holerae), 폐렴 간균(Klebs iellapneumoniae), 녹농균(Pseudomonasaeruginosa), 이질균
사진 1.그람 양성균과 그람 음성균 비교
1884년 덴마크의 미생물학자인 HansChristainGram이고 안한 특수 염색법으로, 이를 통해 그람 양성균과 그람 음성균을 분류할 수 있다.
보라색의 염기성 색소인 crystalviolet으로 염색(1분간) 하면 그 람 양성균과 그람 음성균 모두 보라색으로 염색된다.
이 때 그람 양성균은 복합물이 남아보라색으로 보이고, 그람 음성균이 탈색되어 백색으로 보인다.
조동나사를 돌려 대물렌즈가 슬라이드 글라스에 근접하도록 한다.
슬라이드를 뒤집어서 D.W로 세척한다.
도 말, 고정한 슬라이드에 crystalviolet을 가하여 1분간 염색한다.
슬라이드를 뒤집어 염색액을 D.W로 씻어낸 후 열고 정한다.
iodine을 D.W로 씻어낸다.
비교 사진과 실험사진을 보면 균 1은 자주색으로 균 2는 분홍색으로 염색되었다.
수세 과정 없이 진행된다면 그람 음성균인 경우에는 탈색이 되더라도 주변에 남아있는 crystalviolet 염색제와 대조염색(safranin)를 했을 때 그람 음성균의 검체(red)가 그 람 양성균(violet)으로 잘못 판독될 수 있다.
그람 염색의 반응상
그람불 확정 세균은 그람 염색에 예측 가능한 반응을 하지 않으므로 그람 양성 또는 그람 음성으로 결정할 수 없다.
KOTITI 시험연구원] 그람 염색, Gram.. : 네이버 블로그(naver. com) |
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벤슨 1장/현미경(Microscope)/1p, 4p, 5p
일반생물학 실험서/오병운 외 6명/바이오사이언스출판/5p, 6p, 176p
[KOTITI시험연구원] 그람염색, Gram .. : 네이버블로그 (naver.com)
제품실험자료 - (주)생물나라 (biozoa.co.kr)
Eldon D.Enger. 《생명과학개론 13판 (Concepts in Biology, 13th Edition)》.
Tim, Sandle (21 October 2015). Pharmaceutical Microbiology: Essentials for Quality Assurance and Quality Control.
Lee, Elisabeth H.L.; Winter, Heinrich L.J.; van Dijl, Jan Maarten; Metzemaekers, Joannes D.M.; Arends, Jan P. (2012년 12월). “Diagnosis and antimicrobial therapy of Mycoplasma hominis meningitis in adults”. 《International Journal of Medical Microbiology》 302 (7-8): 289–292.
Gautier-Bouchardon, Anne V. (2018년 7월 27일). “Antimicrobial Resistance in Mycoplasma spp”. 《Microbiology Spectrum》 6 (4). |
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