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주제 : 종이 크로마토그래피에 의한 물질 분리
부제 : 종이 크로마토그래피(paperchrom atograpHy)를 이용하여 광합성 색소와 아미노산을 분리한다.
크로마토그래피는 용질이 정지상과 이동상과의 상호작용에 따른 메커니즘에 의해서 분류
박층 및 여과지 크로마토그래피에서는 용질의 동정은 주로 Rf값에 의한다.
종이 크로마토그래피에 의해 광합성의 색소와 아미노산이 분리될 것이다.
표2.아미노산의 표준Rf값
종이 크로마토그래피에 의한 광합성 색소 분리관찰
종이 크로마토그래피에 의한 아미노산의 분리 관찰
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Ⅰ. 이론 및 원리
1. 크라마토그래피 (chromatograpH y)
2. 종이 크로마토그래피 (paper chromatography; PC)
3. Rf값 (Rf값 value)
Ⅱ. 가설 설정(Setting up hypothesis)
Ⅲ. 실험(Experiment)
1. 실험재료(Materials)
2. 실험 방법(Methods)
Ⅳ. 결과
1. 광합성 색소의 분리
2. 아미노산의 분리
Ⅴ. 참고 문헌 |
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크로마토그래피는 이동산의 상태에 따라 분류
액체크로 마토그래피(liquidc hrom atograpHy; LC) : 이동상이 액체인 크로마토그래피 방법으로 주로 칼럼이나 평면에서 분리를 진행하는 방법
초임계 유체크로 마토그래피(supercriticalfluidc hrom atography, SFC) : 이동상으로 임계 온도와 입계 압력이상의 초임계 유체를 사용하는 크로마토그래피 방법
고정상의 상태(고체 또는 액체)에 따라 분류
종이 크로마토그래피 : 이동상과 고정상은 액체이며 여과지를 사용하는 경우
매커니즘에 따른 분류
크로마토그래피는 용질이 정지상과 이동상과의 상호작용에 따른 메커니즘에 의해서 분류
흡착 크로마토그래피(adsorptionchrom atography)
주로 고체 정지상과 액체(또는 기체)이 동상을 사용하며, 분석하고자 하는 용질이고 체정지상 표면에 강하게 흡착될수록 크로마토그래피에서 늦게 용리되는 메커니즘을 지니고 있는 방법
분배 크로마토그래피(partitionchrom atography)
고체 지지체에 붙은 액체 정지상 와 이동상 사이에서 분석하고자 하는 용질이 분배되어 그 평형의 차이에 의해 분리되는 메커니즘을 지니고 있다.
이온교환 크로마토그래피는 이온교환수지를 정지상으로 사용하여 전하를 지닌 분석물질을 분리하는 크로마토그래피 방법
혼합물은 모세관 현상에 의해 전개액을 따라 여과지를 이동할 때 물(고정상)과 전개액(이동상)에 녹는 비에 따라 이동속도애차이가 난다.
용매(전개액)가 이동한 거리에 대한 용질(혼합물)의 이동거리를 Rf값이라고 한다.
Rf값=용질의 이동거리 / 용매의 이동거리
박층 및 여과지 크로마토그래피에서는 용질의 동정은 주로 Rf값에 의한다.
광 합성 색소의 분리
메스 실린더에 높이가 약 0.8cm 되도록 전개용액을 넣어준다.
집게를 이용해 건조된 여과지를 전개용액에 담근다.
전개액을 종결 지점까지 전개시킨다.
TLC판을 을 꺼내 상온에서 건조시킨다(전개액이 마를 때까지).
TLC판에 0.1% 닌히드린 용액을 분무하고, 10분간 oven에서 건조시킨다.
각각의 Rf값을 계산해보면 밑에서부터 1, 2.6, 4.8, 12.6이다.
각각의 Rf값을 계산해보면 왼쪽 대조용 표준 아미노산 용액은 밑에서부터 0.288, 0.544이고 오른쪽 아미노산 혼합액은 밑에서부터 0.311, 0.44, 0.55이다.
아미노산의 표준Rf값표와 대조를 해보면 순서대로 세린, 리신, 세린, 글리신, 리신을 의미한다. |
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김영환 외 5명, 2015년, 일반생물학 실험서, 바이오사이언스, 총 209쪽
[네이버 지식백과] 크로마토그래피[chromatography] (화학백과)
https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=5662779&cid=62802&categoryId=62802
이대운, 크로마토그래피: 액체 크로마토그래피의 원리와 응용, 민음사, 1991, 민음사, p19-21.D.C. Harris, 분석화학 제9판, 강용철, 김강진, 김영일, 문명희, 여인형, 이동수, 이승호, 정두수, 정혁 번역, 자유아카데미, 2017, p671-673.
Rf값 [Rf value] (생명과학대사전, 초판 2008, 개정판 2014, 도서출판 여초) |
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2023.09.25
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