[응용화학] 크로마토그래피
Abstract Introduction
(1) 실험 목표
정상과 역상 크로마토그래피의 한 색소 분리를 통하여 크로마토그래피의 원리와 극성의 개념을 배운다.
(2) 실험 도구
실험 A.
100 ml 비커 , 시계 접시 , TLC판
적색 40호, 황색 4호, 청색 1호 기준 물감
미지시료 A, B
전개제
실험 B.
주사기, 카트리지
미지시료 B
증류수, 30% 메탄올, 100% 메탄올
실험 C.
주사기, 카트리지
청색 1호 물감
증류수
(3) 실험 방법
실험 A.
. 준비된 색소 3개와 미지시료 A,B 를 모세관에 묻혀서 TLC 판의 바닥에서 1cm위치에 1cm간격으로 찍어서 만점을 만들고 말린다.
. TLC판을 전개제에 담긴 비커에 넣어 전개를 시작한다.
. 시료의 반점이 전개제에 닿지 않게 하고 수직으로 세운다. 전개제가 증발하지 않도록 시계접시로 덮는다.
. 전개제가 어느 정도 높이에 도달하면 TLC판을 꺼내서 말린다.
. Rf 값을 측정한다.
. 순수한 색소에 들어 있는 Rf 값과 미지의 시료의 값을 비교 해서 미지의 시료에 들어있는 색소를 추측한다.
실험 B.
. 카트리지를 주사기에 끼우고 미지시료 B 한 방울을 카트리지 위쪽에 넣은 후 3ml의 물을 채우고 서서히 압력을 가한다.
. 색소가 분리되는 것을 관찰하고 이들 색소를 극성이 큰 것부터 나열한다.
. 물 대신 30% 메탄올을 넣고 실험한다.
. 카트리지를 사용한 후에는 100% 메탄올 3ml로 카트리지를 씻고, 3ml의 물로 씻어낸 후에 다시 사용한다.
실험 C. 파랑 색소의 묽은 용액 5ml정도를 세척한 카트리지에 통과시키면서 색소가 어떻게 되는지, 그리고 나오는 용액의 색깔은 어떻게 바뀌는지 관찰한다.
1. Date Result
(1) 실험 A.
실험에서 관측된 Rf값을 적는다. Rf값은 다음과 같의 정의한다.
Rf = 물질의 이동거리 / 전개제의 이동상
적색 40호
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