Reversed Phase Chromatography에 의한 색소분리
1. Abstract
① Introduction
C18 cartridge와 색소 분광기를 이용해서 색소를 분리하는 실험을 해보고 분자의 극성 및 크로마토그래피의 원리를 이해한다.
② 원리
♨ 분자의 극성
전자에 의해 화학 결합이 이루어진다는 것이 화학의 대명제라면 결합을 이루고 있는 두 원자 사이의 전기음성도 차이가 결합의 극성을 결정하고 분자 내에서 원자들의 배열이 분자 전체의 극성을 결정한다는 것 또한 중요한 화학의 원리이다.분자의 극성은 끓는점, 용매로서의 성질, 표면장력 등의 물리적 성질을 결정한다. 수소, 메탄, 암모니아, 물의 성질을 비교해보면 극성의 중요성을 쉽게 깨달을 수 있다.
그런데 이 분자들의 3차원적 구조와 원소들의 전기음성도 (H = 2.21; C = 2.55; N = 3.04; O = 3.44)로부터 dipole moment의 값을 이해할 수 있다. (수소 = 0; 메탄 = 0; 암모니아 = 1.47; 물 = 1.85 Debye) 이러한 분자들의 극성은 van der Waals force와 수소 결합의 세기를 결정하고 이에 따라 끓는점의 차이가 나타난다. (수소 = -253℃; 메탄 = -161℃; 암모니아 = -33℃; 물 = 100℃)
♨ 크로마토 그래피의 원리
물은 높은 극성 때문에 많은 화합물을 특히 생화학 반응의 용매로서 물을 떠나서는 생명을 생각할 수 없다. 물에 녹는 대부분 화합물의 극성은 무극성인 메탄과 물의 극성 사이에 속하고, 뿐만 아니라 많은 경우에 분자 내에 극성이 낮은 부위가 존재하므로 이러한 분자들의 극성을 이용하여 여러 가지 화합물들을 분리할 수 있다.
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