생물학 실험 - 색소분리
1. ABSTRACT
1) 실험목표
본 실험에서는 크로마토그래피의 원리를 이해하고 이 방법을 이용하여 광합성 관련 색소를 검출해 보도록 한다. 또한 spectrophotometer를 이용하여 색소의 최대 흡수 파장을 알아보도록 한다.
2) 실험이론
① 광합성
광합성은 녹색식물이 빛에너지를 이용하여 CO2와 물로부터 유기화합물을 생성하는 것이다. 이 반응의 가장 중요한 과정은 식물이 생산자 역할로써 빛에너지를 화학에너지로 전환하는 것이다.
빛E
6CO2 + 12H2O -------] C6H12O6 + 6O2 + 6H2O
엽록체
광합성은 엽록체라 불리는 식물의 세포소기관에서 수행된다. 엽록체는 빛에너지를 흡수하고 광합성 색소를 가지고 있으며, 광합성은 빛을 흡수하고 전자 수용체와 전자전달계를 통하여 화학에너지로 전환시킨다.
② 분광광도계(spectrophotometer)
분자 흡수 스펙트럼은 분광광도계를 이용하여 측정한다. 하나의 특정 파장에 대해 시료가 들어 있는 셀을 통과시킨다. 그리고 시료 셀을 통과한 빛의 세기를 측정한다. 셀 벽에 의한 빛의 흡수나 산란의 효과를 없애주기 위하여 blank셀에 빛을 통과시킨다. 분광광도계는 관심이 있는 파장영역에서 파장을 변화시켜가며 각 파장 마다 투과도 또는 흡광도로 나타나는 그래프를 기록할 수 있다. 흡광도에 관해서 다음과 같은 식이 성립한다.
여기서 은 몰 흡광계수를 말하고 C는 용질의 농도, l은 셀의 길이이다. 이 식은 비어-람베르트 법칙이다. 의 크기는 흡수하는 분자와 빛 사이의 상호작용과 전이에 관여하는 초기상태와 최종상태의 입자 수 차이에 의해 결정된다.
③ 크로마토그래피
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