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일반생물학 - 대장균의 DNA 추출과 정량에 대한 실험 보고서
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일반생물학 - 대장균의 DNA 추출과 정량에 대한 실험 보고서
1. Abstract
이번 실험은 우리가 이론상으로만 알고 있던 DNA를 직접 추출해 눈으로 관찰해 봄으로써 DNA에 대한 이해를 높이고 겔로딩 과정을 익혀볼 수 있는 실험이다. 그래서 이번 실험에는 구하기가 쉽고 실험하기 안전한 대장균의 DNA를 직접 추출해보고, 전기영동을 한 뒤 UV lamp를 통해 관찰해 보았다.
먼저, 대장균을 원심 분리시켜서 추출해 낸 뒤 EDTA 용액을 통해 세포벽을 제거하고, 10% SDS 용액을 이용해 세포막을 파괴시킨 다음 NaOH 용액을 사용해 DNA를 용해시킨다. 그러면 모든 세포소기관 및 DNA가 수용액 속에 전부다 녹아들어 용액이 맑아지게 되는데 여기에 NaCl과 95% EtOH를 넣어주어 DNA가 뭉쳐지도록 만들어 DNA를 침전시킨다. 그 후 침전된 DNA를 유리막대로 감아 추출해낸 뒤 DNA에 loading buffer을 첨가하고 겔 전기영동을 시킨다. 그렇게 완료된 겔 전기영동을 UV lamp를 통해 관찰해 보면 DNA와 Plasmid, RNA 등을 관찰해볼 수 있다.
2. Introduction
대장균은 주로 포유류의 장속에 사는 세균으로, 특히 대장에 많이 존재한다 하여 대장균이라 불린다. 대부분의 대장균과 그의 변종은 해롭지 않지만, 일부 대장균들은 사람에게 식중독을 일으키며, 가끔 대규모의 식품 리콜의 원인이 된다. 해롭지 않은 대장균들은 인간의 공생동물이며 비타민 K2등을 생산하여 이로움을 주기도 하며, 창자에서 병의 원인이 되는 박테리아의 번식을 막기도 한다. 대장균은 창자에만 있는 것은 아니나 밖으로 방출되더라도 장관내 이외의 자연계에서는 보통 증식이 되지 않는다. 또한 쉽게 번식하고 유전적으로 단순하고 다루기 쉽고 안전하여 가장 많이 연구된 원핵생물의 표본생물이며, 바이오테크놀로지에서도 중요하게 쓰인다. 따라서 이번 실험에서도 대장균이 실험하기 매우 용이하기 때문에 DNA추출 대상을 대장균으로 정하였다.
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2014.03.27
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