영양생화학 실험 - SDS-PAGE에 의한 단백질 분리와 Western Blotting
실험제목
SDS-PAGE에 의한 단백질 분리와 Western Blotting
실험목표
SDS-PAGE로 단백질을 분리한 후 전기영동을 통해 단백질의 분자량을 측정, 단백질항체이용 분석을 할 수 있다.
실험기구 및 시약
pipette, 마이크로 피펫, e.p 튜브, 팁, 볼텍스기, SDS-gel, Vertical slab gel unit, comb, n-butanol, methanol, 3MM paper, blocking buffer, Ponceau, skim milk, 전기영동기, transfer장치, nitrocellulous paper, 스펀지, fillter paper, shaker, ECL 시약, flim, 랩, 알코올
용어정리
Western blotting : antigenic epitope과 반응하는 antibody를 이용하여 단백질 혼합물 중에서 원하는 단백질 (antigen)만을 찾아내는 방법.
SDS-PAGE : sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis
Gel Electrophoresis : 겔 전기영동. DNA나 RNA, 단백질과 같은 큰 분자들을 전기적인 힘을 이용하여 겔에서 이동시켜 크기에 따라 서로 분리하는 기술.
Electrotransfer : 단백질을 전기로 전송하는 것.
실험원리
1. 전기영동의 원리
전기영동은 전기장을 이용하여 입자를 양극 또는 음극쪽으로 이동시키는 현상을 말한다. 이 때 이동하는 속도는 입자의 전하량, 크기와 모양, 용액의 pH와 점성도, 용액에 있는 다른 전해질의 농도와 이온의 세기, 지지체의 종류 등 여러 가지 요인에 의해 결정된다.
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2016.05.13
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