생물학 실험 예비보고서 - PCR을 이용한 유전자 증폭
1. 실험제목 : PCR을 이용한 유전자 증폭
2. 실험일자 : 2013년0월00일 0요일
3. 실험목적
DNA의 원하는 부분을 증폭하는 방법인 PCR의 기본원리를 이해하고, 직접 PCR을 수행하여, DNA를 많은 양으로 증폭시킨다.
4. 실험기구 및 시약
Template DNA, Primer (GAPDH), dNTP, 10X buffer, Polymerase, 증류수, pipette
5. 실험이론
-PCR이란
PCR(polymerase chain reaction)법은 DNA 또는 RNA의 특정영역을 시험관 내에 대량으로 증폭하는 획기적인 기술이다. 중합효소 연쇄반응에 의해, 소량의 유전물질로부터 염기 순서가 동일한 유전물질을 많은 양으로 증폭할 수 있으므로, 인간의 DNA를 증폭하여 여러 종류의 유전질환을 진단하는 데 사용된다. 또한 세균이나 바이러스, 진균의 DNA에 적용하여 감염성 질환의 진단 등에 사용할 수 있다. 그 원리는 극히 단순하고, 쉽게 응용할 수 있기 때문에 순수 분자생물학 분야 이외에도 의학, 이학, 농학, 수의학, 식품과학, 환경과학 뿐만 아니라 고고학이나 인류학에 이르는 분야까지 그 활용범위를 넓혀가고 있다.
-PCR증폭효율에 영향을 미치는 요인
①각 단계의 반응온도와 시간
②cycle 수
③반응액 조성(주형 DNA, dNTP농도, Mg²⁺농도 등)
④primer 설계
⑤사용 DNA polymerase
또한 몇 가지 반응 첨가물(DMSO, 비이온계면활성제, 글리세롤) 등에 따라 반응촉진효과가 나타나는 경우가 있다.
-중합효소 연쇄반응은 다수의 DNA 서열 사본을 만든다.
※DNA를 연구하고 유전적인 조작을 하기 위해서는 다수의 DNA사본을 만들 필요가 있다. 그 이유는 종종 생물 시료에서 분리한 DNA의 양이 이 목적으로 사용하기에는 적기 때문이다.
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2013.11.12
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