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생화학실험 - Peptide Mass Fingerprinting Ⅱ [MALDI - TOF]
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1. 실험제목: Peptide Mass Fingerprinting Ⅱ (MALDI - TOF)
2. 실험일자:
3. 제출자 :
4. 목적 : MALDI - TOF 의 원리와 사용법을 익히고 이해한다. 지난 실험의 결과로 얻은 peptide sample을 분석해본다.
5. 원리:
1. Mass spectrometry
질량분석기는 질량과 전하의 비율을 측정함으로써 분자의 질량을 측정한다. 질량분석기에 의한 분자량 측정은 분자이온의 생산, 분리, 그리고 탐지에 기본을 둔다. 질량분석기를 이용한 측정은 이온화된 분석물질의 가스상태에서 수행된다. 질량분석기는 ion source, mass analyzer, detector로 구성된다. Ion source에서는 sample을 이온화시키는데, ESI(Electrospraty ionization)와 MALDI가 일반적으로 사용된다. ESI는 용액으로부터 분석물질을 이온화시키고 용액을 바탕으로 하는 분리도구에 쉽게 연결된다. MALDI - TOF는 laser 진동을 통해 크리스탈화된 matrix 샘플을 승화시키고 이온화한다. Analyzer에서는 m/z 비율에 따라 ion을 분리한다. 분석 타입에는 ion trap, time-of-flight, quadrupole, FT-MS 분석기 등이 있다. Detector에서는 현재 이온을 모니터링하고, 그것을 증폭시킨다. 그리고 그 signal은 mass spectrum 형식으로 기록되는 데이터 시스템에 전송된다. 이온들의 m/z 값은 샘플내의 수많은 구성성분들과 각각의 구성성분의 분자량과, 그리고 샘플 내에 다양한 구성성분의 상대적 존재도를 보여주기 위한 강도들로 구성된다. 일반적인 것들로는 광전자 photomultiplier, electron multiplier 그리고 micro-channel plate detector이다.
2. MALDI-TOF
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